MagVigen™ – anti CD8a, Human Nanoparticles

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mag vigen–抗CD8a磁性納米顆粒是快速分離或去除人CD8a的理想選擇+祖干細(xì)胞。涂有抗CD8a單克隆抗體的MagVigen磁性納米顆粒可識別并有效結(jié)合CD8a+短時(shí)間培養(yǎng)后的細(xì)胞。納米顆粒結(jié)合的CD8a+細(xì)胞可以用磁鐵從樣品的其余部分分離出來。

magvigen-anti-CD8a提供了高純度和高活性細(xì)胞的高回收率，可用于進(jìn)一步的下游分子檢測。珠子結(jié)合的細(xì)胞可以被裂解用于進(jìn)一步的蛋白質(zhì)或核酸分析。MagVigen納米顆粒比傳統(tǒng)微珠小得多。該特征允許納米顆粒更好地接近細(xì)胞表面的抗原表位。此外，MagVigen納米顆粒的表面經(jīng)過涂層處理，可減少與非靶向CD8a陰性細(xì)胞的非特異性相互作用。

產(chǎn)品內(nèi)容

• mag vigen–抗CD8a磁性納米顆粒溶于1ml pH 7.4的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中。

物種反應(yīng)性:人類。其他未測試。

Cat# K51004還包括:

• 洗滌緩沖液(10倍)，15毫升

所有材料應(yīng)儲存在4°c下。保質(zhì)期:6個(gè)月

方案:Deplete or positively isolate CD8a+ cells

1. 用等體積的PBS +2mM EDTA稀釋血液。




2. 在50毫升錐形離心管中的Ficoll-Hypaque溶液上緩慢分層稀釋的血液。每1毫升血液使用2毫升Ficoll-Hypaque(不含，由適馬·奧爾德里奇公司生產(chǎn))。




3. 室溫下400g離心40分鐘，無制動。




4. 收集位于血漿和Ficoll-Hypaque界面的單核細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移至15-ml錐形管中。




5. 用4倍體積的冷PBS稀釋吸出的單核細(xì)胞。




6. 在4°C下以400g離心10分鐘，棄去上清液。




7. 將1毫升外周血中的單核細(xì)胞重新懸浮在1毫升Ca中

   2+

   和Mg

   2+

   補(bǔ)充有0.05% BSA和5 mM EDTA的游離PBS緩沖液。




8. 用200μl PBS緩沖液洗滌25μl MagVigen-CD8a珠子兩次。重新分散在25μl PBS緩沖液中。




9. 向含有4-5百萬個(gè)細(xì)胞的單核細(xì)胞溶液中加入預(yù)洗滌的珠子，并在4℃下溫和旋轉(zhuǎn)孵育1-2小時(shí)。




10. 用磁鐵將試管放置5分鐘。

• 對于耗盡:將上清液轉(zhuǎn)移到新試管中以備后用，并丟棄珠子。




• 對于陽性隔離:當(dāng)試管仍在磁鐵中時(shí)，小心地取出并丟棄上清液。

• 再次重復(fù)上述洗滌步驟。




• 在200μl PBS緩沖液中洗滌珠結(jié)合的細(xì)胞，并如上沉淀珠結(jié)合的細(xì)胞。




• 將分離的細(xì)胞重新懸浮在PBS或優(yōu)選的細(xì)胞培養(yǎng)基中，以進(jìn)一步用于下游應(yīng)用。

MagVigen™ – anti CD8a, Human Nanoparticles