銅螯合配體設計的最新進展，例如作為穩(wěn)定Cu(I)氧化態(tài)的THPTA或BTTAA水溶液，提高銅催化的動力學疊氮-炔環(huán)加成(CuAAC)反應和大大提高炔烴檢測的靈敏度。銅螯合
配體也顯示出增加生物相容性CuAAC反應通過防止銅離子引起生物損害1。改進CuAAC的下一步反應是發(fā)展銅螯合疊氮化合物作為更多反應底物。因為據推測疊氮化銅締合是CuAAC催化過程中的限速步驟環(huán)2，在疊氮化物上引入銅螯合部分報告分子可以顯著提高有效的Cu(I)在反應部位的濃度，增強最弱環(huán)節(jié)中的反應速率加速(圖2)。一直都是提出螯合疊氮化物的高反應性來自銅-疊氮基的快速相互作用發(fā)生在形成乙炔化銅，這導致去質子化炔烴在決定速率的步驟3。這一概念被成功地用于使用吡啶基進行CuAAC反應
銅螯合疊氮化物(吡啶甲基疊氮化物)作為基質4-6。然而，吡啶甲基疊氮分子的銅螯合基序不是wan全，需要銅螯合劑(例如THPTA)的存在以實現CuAAC動力學的顯著改善反應3，4。為了提高CuAAC反應在復雜介質中的性能，Click Chemistry Tools開發(fā)了新的螯合在其結構中具有完整銅螯合系統(tǒng)的疊氮化物，稱為“疊氮化物Plus"(圖3)。這些疊氮化物能夠形成強的活性銅絡合物，因此被認為是CuAAC反應中的反應物和催化劑。使用這些疊氮化物的類型，CuAAC反應成為雙分子反應，并顯示出比CuAAC快得多的動力學用常規(guī)疊氮化物進行的反應。

使用瓊脂糖-炔烴樹脂標記進行CuAAC反應的比較動力學測量(圖4)實驗(3.0毫米硫酸銅有(6.0 mM)或沒有THPTA配體)使用Cy5疊氮化物Plus、Cy5吡啶甲基疊氮化物和Cy5雙三唑疊氮化物–迄今為止報道的最快的銅螯合疊氮化物7。正如所料，吡啶甲基疊氮化物含有不wan全的銅螯合基序表現出相對較慢的反應性，特別是在沒有THPTA存在的情況下。動力學數據顯示完成銅螯合部分大大增強了反應性，并且重要的是不需要銅螯合部分的存在配體。有趣的是，由Click Chemistry Tools開發(fā)的銅螯合疊氮化物在CuAAC反應與迄今為止報道的具活性的銅螯合疊氮化物的比較，雙三唑疊氮化物。

新的銅螯合疊氮化物可以形成疊氮化物-銅絡合物，該絡合物幾乎立即與炔烴反應在稀釋條件下。CuAAC反應中這種反應性對低豐度的檢測具有特殊價值靶點，提高生物相容性，以及高度期望大大提高S/N比的任何其他應用。

Click Chemistry Tools提供了一系列熒光疊氮化物Plus探針，包括AFDyes、Cy Dyes和經典共軛染料至疊氮化物基團。我們的AFDyes的光物理性質與Alexa Fluor®染料可以匹配。疊氮化物加部分的特殊反應性、AF染料的生物相容性和亮度使這些探針具有特殊的價值。不僅用于低豐度目標的檢測，而且用于增加S/N比具有巨大價值的所有其他應用。